政治上的成功给崭露头角的屈原带来了荣誉，坚定了他实现“美政”的信心，也招致了政治上的反对派——守旧派、亲秦派贵族的嫉恨和反对。他们互相勾结，攻击屈原，一些嫉妒屈原的利禄之徒也趁机媒孽其短，煽风点火，寻衅闹事。屈原志高行洁，不苟合，不妥协，不顾自己的安危和他们斗争，这就使得互相勾结的腐朽贵族集团对他必欲置之死地而后快。
尖锐的公开冲突是从一次法令起草事件爆发的。一次，屈原奉命起草一份内政改革方面的法令，稿子还未写好，就被素来嫉妒他的同僚上官大夫靳尚看到了。靳尚想看看法令草稿的内容，屈原拒绝了他。靳尚恼羞成怒，就到怀王面前诬告屈原，说屈原起草政府法令是大王授意的，可是每有政府的法令发出，屈原便吹嘘自己，说“没有我屈原，谁也定不出这样的法令”。怀王本不是什么贤君圣主，听说屈原看不起他，非常恼火，便疏远了屈原。不久，贬屈原为三闾大夫。三闾大夫是掌管屈、昭、景三姓王族宗族事务的官，无权过问外交和政务，这实际上是剥夺了屈原的政事决策权。这对屈原在政治上是一次很大的打击。
怀王十五年（公元前313年），秦派著名的“连横”派代表人物张仪到楚国游说，张仪用重币贿赂亲秦派的靳尚、令尹子兰、司马子椒及郑袖等。让他们共谮屈原，从内部瓦解齐楚的“纵亲”关系，答应齐楚的“纵亲”关系决裂后，秦“献商、於（今陕西商县、河南峡县之间）之地六百里”给楚，以此诱骗怀王，使齐楚绝交。